ГЕНЕТИКА

Обсуждение результатов

Мыши. Исследования проведены на мышах линии Af(B) и СЗНSn обоего пола двухмесячного возраста.

Опухоль. В опыте использована форма опухоли Эрлиха.

Сыворотка. На 9 - 10-й день после прививки 6106 клеток опухоли Эрлиха внутрибрюшинно производили тотальное обескровливание мышей- путем рассечения аксиллярного сосудистого сплетения. Кровь выдерживали в термостате при t 37° С в течение 30 мин, затем одни сутки при 4° С в рефрижераторе. Сыворотку отсасывали пастеровской пипеткой. Аналогичным путем получали сыворотку у нормальных мышей. В опытах использована цельная сыворотка.

Комплемент. Использован цельный сухой комплемент морской свинки, изготовленный Белорусским институтом эпидемиологии, микробиологии и гигиены. Активность проверена на гемолитической системе. Сухой комплемент разводили 0,85% -ным физиологическим раствором NaCl (1 мл на дозу).

Опухолевые клетки отмывали раствором Рингера путем трехкратного центрифугирования при 1000 обмин в течение 5 мин. После отмывания добавляли раствор Рингера и получали исходную клеточную суспензию, которую разводили так, чтобы в 0,05 мл находилось нужное, количество опухолевых клеток. Реакцию проводили в стеклянных пробирках емкостью 1,5 мл. К 0,05 мл суспензии опухолевых клеток (соответствующего разведения) добавляли 0,1 мл цельной исследуемой сыворотки я 0,1 мл цельного комплемента морской свинки. Смесь выдерживали в термостате при t 37° С 1 час, добавляли 0,2 мл 0,2%-ного раствора сини и через 5 мин в камере Горяева подсчитывали количество окрашенных и общее количество клеток (не менее 300). Если реакция проводилась с небольшим количеством опухолевых клеток, то смесь после инкубации в термостате центрифугировали при 1000 обмин в течение 5 мин, жидкость удаляли, к осадку добавляли 0,05 мл сини. В этих случаях для определения процента жизнеспособных клеток в контроле к 0,05 мл суспензии опухолевых клеток добавляли 0,2 мл раствора Рингера, смесь центрифугировали при 1000 обмин 5 мин, жидкость удаляли, к осадку добавляли 0,05 мл 0,1%-ного раствора сини, подсчитывали число окрашенных клеток.

© 2008 Все права защищены medtravnik.ru